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【PCR扩增gc含量很高的序列我要克隆一个gc含量很高(75%)的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc含量很高(大于80%),但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终】
更新时间: 2025-08-29 20:15:51
1人问答
问题描述:

PCR扩增gc含量很高的序列

我要克隆一个gc含量很高(75%)的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc含量很高(大于80%),但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终止子上.

请问对于设计引物和pcr扩增有什么好的建议.

高岚回答:
  没事,照常扩吧   gcbuffer,然后可以引物退火温度高一些,60以上.采用2步法试试
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