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回答下列有关基因工程的问题:(1)获取目的基因时,可从基因文库中直接提取,而基因文库包括___和___,其中要用到反转录技术的是___.(2)构建基因表达载体时,用限制酶Ⅰ切割质粒
更新时间: 2025-08-27 17:39:26
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问题描述:

回答下列有关基因工程的问题:

(1)获取目的基因时,可从基因文库中直接提取,而基因文库包括___和___,其中要用到反转录技术的是___.

(2)构建基因表达载体时,用限制酶Ⅰ切割质粒运载体可产生“CGATATCG…CC…GCTATAGC”的片段,该限制酶识别的核苷酸序列是___,用限制酶Ⅱ切割含有目的基因的DNA,两种酶切割DNA产生的末端能拼接到一起,则限制酶Ⅱ必须具有___的特点.作为一个完整的基因表达载体,必须具备启动子、___(至少答出两种)等.其中启动子是___识别和结合的部位.

(3)将目的基因导入受体细胞时,如果受体细胞是水稻(单子叶植物)细胞,则常用的方法是___;如果受体细胞是大肠杆菌,则需要用钙离子处理,处理后的细胞具有___的特点.

(4)检测与鉴定目的基因时,检测目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键是___.

邱燕霖回答:
  (1)获取目的基因时,可从基因文库中直接提取,而基因文库包括基因组文库和部分基因文库,其中要用到反转录技术的是部分基因文库.   (2)构建基因表达载体时,限制酶Ⅰ识别的核苷酸序列是-CGATATCG-.用限制酶Ⅱ切割含有目的基因的DNA,两种酶切割DNA产生的末端能拼接到一起,则限制酶Ⅱ必须具有切割产生的粘性末端和限制酶Ⅰ切割产生的粘性末端相同的特点.一个完整的基因表达载体包括:目的基因、启动子、终止子、标记基因.目的基因是外源基因,是基因表达载体的必须组成;启动子是基因表达载体的必须组成,是RNA聚合酶的识别位点;标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来;终止子是基因表达载体的必须组成,能终止转录过程.   (3)将目的基因导入受体细胞时,如果受体细胞是水稻(单子叶植物)细胞,则常用的方法是农杆菌转化法;如果受体细胞是大肠杆菌,则需要用钙离子处理,处理后的细胞具有吸收周围环境中的DNA分子的特点.   (4)检测与鉴定目的基因时,检测目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键是目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA上.   故答案为:   (1)基因组文库    部分基因文库    部分基因文库   (2)-CGATATCG-切割产生的粘性末端和限制酶Ⅰ切割产生的粘性末端相同   标记基因、终止子  RNA聚合酶   (3)农杆菌转化法   吸收周围环境中的DNA分子   (4)目的基因是否插入到受体细胞染色体DNA上
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