潮霉素抗性基因（Hyg）抗卡那霉素吗?或者卡那霉素抗性基因（Npt）看潮霉素吗?
更新时间： 2025-08-22 15:42:54
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问题描述：
潮霉素抗性基因（Hyg）抗卡那霉素吗?或者卡那霉素抗性基因（Npt）看潮霉素吗?
田小果回答：
说到农杆菌就必须提到双元表达载体双元表达载体系统主要包括两个部分：一部分为卸甲Ti质粒，这类Ti质粒由于缺失了T－DNA区域，完全丧失了致瘤作用，主要是提供Vir基因编码表达Vir蛋白的功能，VIR基因编码的virD2蛋白相当于反式作用元件，能够识别农杆菌转运DNA（T-DNA）两端24bp序列,进而将T-DNA以单链的形式切割下来，同时，VIR基因编码的virE2能够与单链T-DNA结合，形成T-复合物，在核定位序列的作用下，经过宿主细胞T4SS转运体系进入宿主细胞质。之后便是宿主细胞的转运过程，激活处于反式位置上的T－DNA的转移。另一部份是微型Ti质粒(Mini-Tiplasmid)，它在T－DNA左右边界序列之间提供植株选择标记如NPTII基因以及LacZ基因等。双元载体系统的构建的原理是Ti质粒上的Vir基因可以反式激活T－DNA的转移。与共整合载体所不同的是，它不依赖两个质粒之间的同源序列，不需要共整合过程就能在农杆菌内独立复制。常用的农杆菌中已经转化了“卸甲Ti质粒”，这个质粒也有抗性，一般是庆大霉素和利福平等，而卡那霉素和潮霉素很少用在这个载体上的。你自己构建的载体应该属于“微型Ti质粒”，这个载体会有两个抗性，一个是农杆菌识别的启动子驱动的抗性基因，是在农杆菌筛选阳性菌时用的，一个是35S驱动的抗性基因，这个是筛选植物抗性时使用的你看看Hyg前是不是35S驱动的，如果是，那Hyg是在植物中表达的，用于筛选植物的抗性基因。
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