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【sod计算方法】
更新时间: 2025-08-21 15:23:16
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sod计算方法

陈亚文回答:
  SOD活性的测定方法[2005-10-3112:51:00|By:abingxu]0推荐pH7.8最适,按邵从本等(1993)方法.1.试剂:反应液:含13×10-3M甲硫氨酸(MW=149.21292),75×10-6MNBT(MW=817.7),2×10-6M核黄素(MW=376.36),100×10-9MEDTA,50×10-3M磷酸缓冲液,pH7.8.4.096225gNa2HPO4.12H2O,0.16576075gNaH2PO4.2H2O用蒸馏水溶解,加入0.484942g甲硫氨酸、0.01533gNBT、0.00075272g核黄素(扩大10倍,溶于10ml蒸馏水,取0.25ml,此2种药剂现用现加)及0.000037224gEDTANa2(配时扩大100倍,用蒸馏水定容100ml后,取0.75ml),定容至250ml,4℃避光保存.2.操作:取30支粗细、厚薄一致的洁净试管,分别加入3.98反应液,29支加20ul()酶液,另一支不加酶液加同样体积的提取缓冲液,以1支加酶的不作光照处理的为空白对照,余4000Lux照光20-25分钟后测OD560,每提取液重复3次,取平均值.3.计算:在上述条件下,抑制50%NBT光化还原的酶量定为一个酶单位,按ConstantineN.etal1977(Pl.Physiol.59:309-314)方法计算酶比活力.SODunits/mgprotein={[OD560(不加酶)/OD560(加酶)-1]×稀释倍数×4(反应液体积)}/[0.02(所加酶液ml数)×每ml酶粗提液含蛋白mg]
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