【许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因，其编码的产物β半乳糖苷酶在Xgal和IPTG两种物质存在时，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色．基因工程中常利用该原理从导入质粒】-保卡通问答

【许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因，其编码的产物β半乳糖苷酶在Xgal和IPTG两种物质存在时，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色．基因工程中常利用该原理从导入质粒】

更新时间： 2025-08-28 09:11:30

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问题描述：

许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因，其编码的产物β半乳糖苷酶在Xgal和IPTG两种物质存在时，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色．基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如图所示．

（1）构建基因表达载体的目的是___．

该过程是在___（操作环境）进行的，需要使用限制酶和___酶．

（2）转化过程中，大肠杆菌应先用___处理，使其处于能吸收周围DNA的状态，这种细胞称为___细胞．

（3）在相同条件下的培养基中，菌落___（填序号）颜色一定为白色的．

（4）检测菌落③中的目的基因是否表达的第一步，可采用的检测办法是___．

（5）人们获得目的基因后往往先进行扩增，通常利用的是___技术，该技术中使脱氧核苷酸单链延伸时需要利用的酶是___，该酶的特点是___．

陈伟根回答：

网友采纳

　　（1）构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，能遗传给后代，并表达和发挥作用．　　基因工程的操作均是在生物体外进行的，需要使用限制酶和DNA连接酶．　　（2）转化过程中，大肠杆菌应先用Ca2+处理，使其处于能吸收周围DNA的状态，这种细胞称为感受态细胞．　　（3）用限制酶EcoRI切割质粒时，会破坏质粒上的lacZ'基因，但切割后的质粒自身环化后，lacZ'基因又被修复，能表达产生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG 存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，所以菌落①②呈现蓝色；菌落③导入的是重组质粒，其lacZ'基因被破坏，不能表达产生B-半乳糖苷酶，在X-gal和IPTG 存在下，菌落颜色为白色．　　（4）检测菌落③中的目的基因是否表达的第一步（即目的基因是否发生转录），可采用的检测办法是分子杂交．　　（5）人们获得目的基因后往往先进行扩增，通常利用的是PCR技术，该技术中使脱氧核苷酸单链延伸时需要利用Taq酶（热稳定DNA聚合酶），该酶的特点是耐高温（具有热稳定性）．　　故答案为：　　（1）使目的基因在受体细胞中稳定存在，能遗传给后代，并表达和发挥作用　　生物体外 DNA连接　　（2）Ca2+感受态　　（3）③ 　　（4）分子杂交　　（5）PCR Taq酶（热稳定DNA聚合酶）耐高温（具有热稳定性）