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SDS-PAGE跑了4、5回了,条带颜色总是特别浅看不清楚,连MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?连着练了好几天了,每次都不出结果,用相同的样品在别人制的胶上面跑出来就看的清楚,不知道制胶的时候
更新时间: 2025-08-22 14:48:22
1人问答
问题描述:

SDS-PAGE跑了4、5回了,条带颜色总是特别浅看不清楚,连MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?

连着练了好几天了,每次都不出结果,

用相同的样品在别人制的胶上面跑出来就看的清楚,不知道制胶的时候什么最影响条带深浅啊

这两天又跑了好几次,没有一次成功,都是条带颜色浅。

重新配制了分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液,APS也是新配的。样品是昨天新制的,跑出来还是颜色浅,MARKER分别用了两种,颜色都很浅。

染色液是考马斯亮蓝,昨天也新配了。

真不知道是什么原因了。

有一点,我用别人的分离胶缓冲液的时候,分离胶跑1小时就到头了,用我自己配的要跑1个半小时,不知道和条带颜色浅有没有关系,条带形状是正常的。

潘征回答:
  1上样量太少,或者电泳时候loadingbuffer不行,导致蛋白跑了   2脱色时间不够,建议K-G染色后,脱色液在30min内换两次   3重新按标准配置电泳缓冲液.
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