某同学想研究氨基酸的分离和鉴定的方法。已知实验室中有0.5%的赖氨酸脯氨酸缬氨酸苯丙氨酸亮氨酸溶液以及它们的混合液(各组份浓度均为0.5%)。现提供如下器材和试剂:
A.器材
1.层析缸 2.毛细管 3.喷雾器 4.层析滤纸 5.其他相关器材(剪刀铅笔透明胶带等)
B.试剂
1.扩展剂:4份水饱和的正丁醇和1份醋酸的混合物(作为层析液使用)2.显色剂:0.1%茚三酮溶液
一)若该同学想证明混合液确实含有上述5种氨基酸,请利用题给条件设计试验:
1)实验原理:
A.所有氨基酸和一切蛋白质都能和茚三酮发生颜色反应。
B.在一定条件下不同氨基酸在扩展剂的溶解度不同所以在滤纸上的扩散速度不同从而出现在滤纸的不同位置上。
2)实验步骤:
①取层析滤纸一张剪成20厘米长14厘米宽的滤纸条在纸的一端距边缘2-3厘米处用铅笔画一条直线在此直线上每间隔2厘米作一记号共需作 处记号.
②
③将处理好的滤纸条卷成筒状用透明胶带固定放入加好了扩展剂的层析缸中,待扩展剂上升到一定阶段时取出滤纸自然风干。本步骤的注意事项是:
④
3)请在下图中绘出滤纸条上的预期结果:(已知扩散速度为赖氨酸<脯氨酸<缬氨酸<苯丙氨酸<亮氨酸)
用“+”表示起点位置;用“○”表示氨基酸扩散的相对位置。铅笔细线(示起始位置)
4)若用上述5种氨基酸合成5肽在不考虑氨基酸种类重复情况下形成的5肽最多有 种。